Teste de transformação de linfócitos (LTT)

O teste de transformação de linfócitos (LTT) foi desenvolvido na década de 1960 e é usado principalmente em diagnósticos alérgicos. O teste LTT também tem sido usado no diagnóstico de infecções crônicas por Borrelia burgdorferi, que são a causa da doença de Lyme. O teste é especialmente importante quando há dificuldades no diagnóstico da doença. O que é o teste LTT e como interpretar seus resultados?

Índice:

1. Aplicação de teste de transformação de linfócitos (LTT)
2. Teste de transformação de linfócitos (LTT) - borreliose de Lyme
3. Teste de transformação de linfócitos (LTT) - o que é?
4. Teste de transformação de linfócitos (LTT) - resultados

O teste de transformação de linfócitos (LTT) foi descrito pela primeira vez em 1960.

O teste é atualmente utilizado em pesquisas e como ferramenta de diagnóstico em várias áreas da medicina, principalmente na alergologia.

Aplicação de teste de transformação de linfócitos (LTT)

O teste LTT foi usado em:

• a avaliação de defeitos no sistema imunológico, por exemplo, manifestado por aumento da suscetibilidade a infecções
• diagnóstico de infecções bacterianas crônicas (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), protozoários (Giardia lamblia) e virais (vírus do herpes)
• diagnósticos de hipersensibilidade tipo IV (alergia) dependente de linfócitos T a drogas, metais, aditivos alimentares, bolores, alimentos (por exemplo, glúten); O teste LTT tem sido particularmente usado na detecção de alergias a materiais dentários, como dentaduras e obturações

Teste de transformação de linfócitos (LTT) - borreliose de Lyme

Dificuldades de diagnóstico relacionadas ao diagnóstico de borreliose de Lyme forçam os especialistas a procurar outros testes laboratoriais além dos recomendados. Um deles é o teste LTT. Acredita-se que o teste LTT pode ser útil em:

• confirmação de infecção ativa em pessoas com testes sorológicos positivos, mas sem sintomas indicativos da doença de Lyme
• confirmação de infecção ativa em indivíduos com testes sorológicos negativos ou limítrofes, mas com sinais clínicos de doença de Lyme
• monitorar a eficácia da terapia antibiótica
• avaliação da recorrência da borreliose de Lyme

No entanto, deve-se ter em mente que o teste LTT não é um teste recomendado no diagnóstico de borreliose de Lyme pela National Chamber of Laboratory Diagnosticians, o National Institute of Public Health e o National Consultant no campo de doenças infecciosas, porque este teste ainda requer validação (ou seja, confirmação de sua credibilidade) neste caso. a entidade da doença.

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Teste de transformação de linfócitos (LTT) - o que é?

O teste consiste em avaliar a reatividade das células do sistema imunológico (células T da memória imunológica) ao antígeno / alérgeno testado, por exemplo, um medicamento, uma proteína bacteriana. As células imunológicas tornam-se reativas a um determinado antígeno / alérgeno após contato prévio com ele (daí o termo células T de memória imunológica).

Para realizar o teste LTT, as células são obtidas do sangue periférico do paciente retirado de uma veia. Em seguida, no laboratório, as frações celulares individuais são separadas do sangue, nomeadamente as células mononucleares (linfócitos e monócitos).

As células isoladas são então cultivadas em condições apropriadas e então estimuladas com o antígeno / alérgeno específico. Se as células entraram em contato com ele, elas começam a se dividir e então a intensidade dessas divisões é medida.

Modificações individuais no teste LTT medem o ponto final da divisão celular de maneira diferente e podem ser avaliadas indiretamente medindo:

• a produção de moléculas de sinalização como interferon-gama (INF-γ) que são produzidas por células em divisão; outro nome para esta modificação do teste LTT é EliSpot
• atividade do receptor na superfície das células em divisão, por exemplo, CD25, CD69, HLA-DR
• a quantidade de DNA formada durante a fase de síntese que só é encontrada em células T em divisão de antígeno / alérgeno; para este propósito, as fitas de DNA sintetizadas recentemente são marcadas, por exemplo, com 3H-timidina, que é então detectada por um contador especial

O teste é realizado em três ou quatro repetições para aumentar a confiabilidade do resultado obtido.

Vale a pena saber

O teste LTT é um teste de laboratório muito exigente. Requer equipamento de laboratório caro e moderno e a experiência do pessoal que realiza o teste.

Devido a esse fato, o teste só deve ser realizado em centros com experiência na realização do teste LTT.

Teste de transformação de linfócitos (LTT) - resultados

Um resultado positivo do teste LTT indica a presença de linfócitos T de memória imunológica no sangue que estiveram em contato anterior com o antígeno / alérgeno testado. O que pode indicar uma relação causal entre o fator estudado e os sintomas do paciente.

O resultado do teste inclui valores numéricos expressos como um índice de estimulação (SI). SI expressa a intensidade da divisão das células imunes em relação ao controle negativo, que neste caso são células imunes que não foram estimuladas com um antígeno / alérgeno.

Uma pontuação de SI menor que 1 é considerada negativa, uma pontuação entre 2 e 3 é fracamente positiva (limite) e uma pontuação maior que 3 é considerada positiva.

Importante

Que fatores podem afetar o resultado do LTT?

Tomar drogas que suprimem a atividade do sistema imunológico, por exemplo, esteróides (metotrexato, prednisona) pode reduzir a capacidade das células de se dividirem em cultura de células e / ou a produção de citocinas pelas células.

Literatura

1. https://www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
2. Pichler W.J e Tilch J. O teste de transformação de linfócitos no diagnóstico de hipersensibilidade a drogas. Alergia. Agosto de 2004; 59 (8): 809-20.
3. Diagnóstico laboratorial do teste de transformação de linfócitos (LTT) de Rychlik U. et al. Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
4. Diagnóstico laboratorial de doenças transmitidas por carrapatos. Recomendações do Grupo de Trabalho: Câmara Nacional de Diagnósticos Laboratoriais, Instituto Nacional de Saúde Pública-Instituto Nacional de Higiene, Consultor Nacional na área de doenças infecciosas, Departamento de Doenças Infecciosas e Neuroinfecções, Universidade Médica de Białystok, Sociedade Polonesa de Virologia, Varsóvia 2014.

Karolina Karabin, MD, PhD, bióloga molecular, diagnosticadora de laboratório, Cambridge Diagnostics Polska Bióloga com especialização em microbiologia e diagnosticadora de laboratório com mais de 10 anos de experiência em trabalho de laboratório. Graduado pela Escola de Medicina Molecular e membro da Sociedade Polonesa de Genética Humana. Chefe de bolsas de pesquisa no Laboratório de Diagnóstico Molecular do Departamento de Hematologia, Oncologia e Doenças Internas da Universidade Médica de Varsóvia. Ela defendeu o título de doutora em ciências médicas na área de biologia médica na 1ª Faculdade de Medicina da Universidade Médica de Varsóvia. Autor de diversos trabalhos científicos e populares na área de diagnóstico laboratorial, biologia molecular e nutrição. Diariamente, como especialista na área de diagnósticos laboratoriais, ele dirige o departamento substantivo da Cambridge Diagnostics Polska e colabora com uma equipe de nutricionistas da CD Dietary Clinic. Ele compartilha seus conhecimentos práticos sobre diagnóstico e dietoterapia de doenças com especialistas em conferências, treinamentos e em revistas e sites. Ela está particularmente interessada na influência do estilo de vida moderno nos processos moleculares do corpo.